聚焦真人电影男主Larry Daley的儿子Nick Daley，他不情不愿地也成为了一名博物馆管理员，而《博物馆奇妙夜2》里的卡门拉法老又回来了，想要征服世界。

特雷西（萝拉·科克 Lola Kirke 饰）是一名平凡的女大学生，落在人群之中毫不起眼。一成不变的生活和日复一日平淡令特雷西的内心备受煎熬，她一直向往着能够前往纽约生活，在她的内心里，纽约这座灯红酒

在被骗购买了一辆质量不佳的 65 年克莱斯勒后，麦克与邻家女孩凯尔西的第一次约会计划就泡汤了，因为他发现自己成了罪犯、警察和一个疯狂的猫女的目标。

五个朋友在亚利桑那州徒步旅行时意外唤醒了上古恶魔。他们必须与恶魔和崇拜恶魔的小部落战斗以求生存。